Anti-Ki-67抗體免疫組化抗體是一種廣泛應(yīng)用于免疫組織化學(xué)（IHC）檢測的關(guān)鍵生物試劑，用于標(biāo)記細(xì)胞核內(nèi)的Ki-67蛋白，是評估細(xì)胞增殖活性的重要工具。Ki-67抗原由MKI67基因編碼，僅在處于細(xì)胞周期活躍期（G1、S、G2和M期）的細(xì)胞中表達(dá)，在靜止期（G0期）則不表達(dá)，因此其陽性率可準(zhǔn)確反映組織中增殖細(xì)胞的比例，在腫瘤病理診斷、預(yù)后評估和科研分析中具有重要價(jià)值。
作用機(jī)制與檢測原理
在免疫組化實(shí)驗(yàn)中，
Anti-Ki-67抗體免疫組化抗體通過特異性識別并結(jié)合組織切片中細(xì)胞核內(nèi)的Ki-67蛋白。經(jīng)過抗原修復(fù)、一抗孵育、二抗結(jié)合及顯色反應(yīng)（如DAB顯色）等步驟，陽性細(xì)胞核呈現(xiàn)棕褐色，可在顯微鏡下清晰觀察。通過計(jì)算陽性細(xì)胞占總腫瘤細(xì)胞的百分比（即Ki-67指數(shù)或增殖指數(shù)），可量化腫瘤的增殖能力。
臨床應(yīng)用價(jià)值
腫瘤診斷與分型：Ki-67指數(shù)有助于區(qū)分良惡性病變，如在乳腺癌中，高Ki-67表達(dá)常提示腫瘤侵襲性強(qiáng)。
預(yù)后評估：高Ki-67指數(shù)通常與腫瘤生長迅速、復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)高、生存期短相關(guān)，是多種癌癥（如淋巴瘤、神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤、膠質(zhì)瘤）的重要預(yù)后指標(biāo)。
治療指導(dǎo)：在乳腺癌治療中，Ki-67水平可輔助判斷是否需要化療或內(nèi)分泌治療，尤其在Luminal型乳腺癌的分型中具有指導(dǎo)意義。
抗體類型與選擇
目前常用的Anti-Ki-67克隆號包括MIB-1（廣泛使用）、Ki-67、278等，其中MIB-1克隆因穩(wěn)定性高、特異性強(qiáng)而被廣泛認(rèn)可?？贵w可分為即用型和濃縮型，適用于不同自動(dòng)化染色平臺（如Leica、Dako、Roche）。選擇時(shí)需注意抗體的種屬來源（多為小鼠單克隆）、適用樣本類型（石蠟切片或冰凍切片）及驗(yàn)證數(shù)據(jù)。
檢測注意事項(xiàng)
抗原修復(fù)：需進(jìn)行熱誘導(dǎo)抗原修復(fù)（HIER），通常使用EDTA或檸檬酸緩沖液。
陽性對照：建議使用增殖活躍的組織（如扁桃體、淋巴結(jié)）作為對照。
判讀標(biāo)準(zhǔn)：應(yīng)避免壞死區(qū)和邊緣區(qū)域，隨機(jī)選取多個(gè)高倍視野（如400×）計(jì)數(shù)至少500–1000個(gè)腫瘤細(xì)胞，報(bào)告陽性百分比。
